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分提磷脂|一种分离纯化卵磷脂和脑磷脂的方法发表时间：2023-02-01 11:42 分提磷脂|置换色谱最早是由Tswett于1906年提出的，当时他发现在超载淋洗色谱中有样品的置换现象发生，但直至1943年Tiselius才明确定义色谱分离为前沿，淋洗和置换三种模式。置换色谱是一种非线性色谱模式，通常一个运行周期包括平衡，上样，置换，再生四个步骤。被选作置换剂的物质与固定相的作用力应比任何被分离样品组分与固定相的作用力都强，被分离样品在带置换剂的流动相推动下，样品各组分依照与固定相作用力的弱强依次逐步被置换剂置换分离形成一系列相毗邻的纯物质带，流出色谱柱。 虽然置换色谱早已为人们所认识，但限于色谱仪器及填料的限制，应用主要集中在稀土元素和同位素的分离等领域。直到八十年代以后，随着高性能色谱仪和色谱填料的出现，置换色谱的应用才随之广泛起来，特别是在生物分子的分离与纯化方面。Horváth及其合作者们在这方面做出了重要的贡献，分离了氨基酸，肽，药物异构体，激素，抗生素，核苷酸等多种物质；Cramer等人在蛋白质及核酸的置换分离等方面也做了大量的研究工作；黄俊雄等人尝试了药物异构体真实样品的置换分离；Freitag等人对乳清蛋白在填充柱和整体柱上的置换分离进行了比较，还研究了阳离子交换置换色谱分离蛋白质时置换剂质量大小对分离效果的影响。 置换色谱与淋洗色谱相比，具有样品负载量大，产品浓度高，拖尾小，耗用溶剂少，固定相利用率高等优点，因而特别适合于作为制备色谱分离。在相同的柱子上，处理样品量往往比淋洗色谱高出1-2个数量级。Horváth等人都曾在分析柱上成功的进行了置换制备分离。 分提磷脂|磷脂类化合物是细胞膜的重要组成成分，具有重要的生理功能。高纯的磷脂分级产品如卵磷脂和脑磷脂可广泛用于营养，医药及化妆品行业。但由于目前的高纯卵磷脂和脑磷脂多采用高效液相色谱(HPLC)淋洗模式制备，产品处理量小，溶剂消耗大，因而生产成本高，价格昂贵，从而限制了其应用。为了降低成本，许多学者进行了研究，如Kim等人尝试着从简化流动相这一角度出发，采用纯甲醇为流动相对蛋黄磷脂进行了分离，取得了一定的效果，但无法从根本上解决淋洗色谱所固有的缺陷。因此本发明的目的是想改变过去的色谱分离模式，采用适合于制备分离的置换色谱技术，从而从根本上解决这一难题。 |
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